布魯氏菌檢測試劑盒利用實(shí)時熒光PCR原理，主要用于布魯氏菌的定性篩查檢測。針對布魯氏菌基因設(shè)計(jì)特異性引物和分子信標(biāo)探針，在待檢樣本中含有布魯氏菌DNA的情況下，PCR反應(yīng)得以進(jìn)行并釋放熒光信號。利用儀器對PCR過程中相應(yīng)熒光信號進(jìn)行實(shí)時監(jiān)測和輸出，實(shí)現(xiàn)檢測結(jié)果的定性分析。

　　布魯氏菌檢測試劑盒檢驗(yàn)方法：

　　1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復(fù)至室溫。

　　2.取所需用量酶標(biāo)板條，設(shè)空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。

　　3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl；陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl；樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。

　　4.混勻，置37℃反應(yīng)30分鐘。

　　5.扣去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，重復(fù)洗滌5次，拍干。

　　6.每孔加酶標(biāo)記物100μl（空白孔除外）。置37℃反應(yīng)30分鐘。

　　7.洗滌，扣去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，重復(fù)洗滌5次，拍干。

　　8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混勻，37℃避光反應(yīng)10分鐘。

　　9.每孔加終止液50μl，混勻，用空白孔調(diào)零，于450nm測定各孔吸光值。

　　布魯氏菌檢測試劑盒正確使用注意：

　　1.準(zhǔn)備過程，試劑操作準(zhǔn)備的不當(dāng)很可能影響酶聯(lián)免疫吸附測定ELISA結(jié)果。

　　2.當(dāng)混合蛋白溶液時應(yīng)盡量輕緩，避免起泡。

　　3.洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。

　　4.一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

　　5.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。

　　6.如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高，請先稀釋后再測定。